Virkningen av pH -verdien og temperaturen til pyrrolidon på den vandige PVP -løsningen spiller en rolle i cellekonservering. Riktig drift og riktige fryseforhold kan redusere endring eller tap av celleegenskaper. Den ikke -tverrbundne PVP -løsningen har ingen spesiell tiksotropi, med mindre konsentrasjonen er høy, vil den ha tiksotropi og vise en kort avslapningstid. Opplevelse av cellefryskonservering: å velge riktig kryokonserveringsverktøy er kongen. Cellekryokonservering er en teknologi som lagrer celler i et lavt temperaturmiljø for å redusere cellemetabolismen og oppnå langtidslagring. (Pyrrolidon) I de fleste cellelinjer er fortykningsytelsen til PVP nært knyttet til dens relative molekylmasse. Under en gitt konsentrasjon, jo større relativ molekylmasse, desto større viskositet. Celler vil fortsette å akkumulere og forandre seg med aldring og evolusjon, noe som forårsaker fenotype og genotype" kulturdrift" ;. Korrekt og vellykket kryokonservering spiller en viktig rolle i den langsiktige anvendelsen av celler.
Under kryokonserveringsprosessen derfor riktig kultur og skånsom cellesamling. Før kryokonservering bør cellene opprettholde en god veksttilstand (i logfase eller eksponensiell fase). Ideelt sett bør mediet være 24 timer før høsting. Det anbefales å utføre mikrobiell kontaminering av kulturen, spesielt mykoplasma, for å sikre at cellene ikke er forurenset. I celleinnsamlingsprosessen bør den eksperimentelle operasjonen være så skånsom som mulig for å unngå celleskader. (Pyrrolidon) Passende kryobeskyttelsesmiddel. For tiden er den vanlig brukte teknikken for cellekryokonservering flytende nitrogen -kryokonservering. Den langsomme frysemetoden med en passende mengde beskyttelsesmiddel brukes hovedsakelig til å fryse cellene for å redusere skadene på cellene under fryseprosessen. Hvis cellene fryses direkte uten å tilsette beskyttende midler, vil vannet i og utenfor cellene raskt danne iskrystaller, noe som vil forårsake en rekke bivirkninger.
Polyvinylpyrrolidon, etylenglykol, metanol og metylacetamid er alle kryobeskyttelsesmidler. Vanligvis brukt i cellekryokonservering er dimetylsulfoksid (DMSO) og glyserol. Disse to stoffene har liten molekylvekt, høy oppløselighet og kan lett trenge gjennom celler. De kan senke frysepunktet og forbedre permeabiliteten til cellemembraner for vann. For mobilitet. (Pyrrolidon) DMSO har vanligvis en konsentrasjon på 5-10% (v/v), og den optimale konsentrasjonen varierer med cellelinjer. Den endelige konsentrasjonen av glyserol i frysemediet er 5-15%. Igjen, den optimale konsentrasjonen avhenger av cellelinjen. For å forbedre overlevelsesraten for celler som er vanskeligere å bevare, kan du velge å øke serumkonsentrasjonen i konserveringsoppløsningen under kryokonservering. Hvis du vil fryse cellene raskere og mer stabilt, er cellekryokonserveringsvæske et godt valg. Det er ikke nødvendig å forberede, bare tilsett en passende mengde kryokonserveringsvæske direkte til cellene. Operasjonen er enkel, og du kan ha celler med høy levedyktighet.